細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

JEG-3細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持JEG-3細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含JEG-3 細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于JEG-3 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

MEM 培養(yǎng)基                                445 ml

特級(jí)胎牛血清                           50 ml

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豬白介素18(IL-18)ELISA 試劑盒

Human ai Sa aibody (ai-Sa-Ab) ELISA Kit 人抗Sa抗體(ai-Sa-Ab)試劑盒

Porcineierleukin10,IL-10ELISAKit 豬白介素10(IL-10)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAIRA(Humanai-insulieceptoraibody)ELISAKit人抗胰島素受體抗體

血液尿酸含量直接(TPTZ)比色法定量試劑盒50次

MouseUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)試劑盒

豚鼠白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒

Rat angiotensinogen (aGT) ELISA Kit 大鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒

HumanAi-proteinase3aibodyIgG,PR3Ab-IgGELISAKit 人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3Ab-IgG)試劑盒 進(jìn)口分裝

HumancyclophilinA,CyPA試劑盒人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)試劑盒

組織GSK3激酶總活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanPolyADPribosepolymerase,PARPELISAKit人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)試劑盒

人中期因子(MK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人特異生長因子/相關(guān)因子(TSGF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

NDUF3蛋白抗體

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白23抗體

SERPINF2重組小鼠 SerpinF2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CDK4(Cyclin Dependent Kinase 4 0.5mlCDK4(Cyclin Dependent Kinase 4) 周期素依賴性激酶4(抗原)

HOXA1重組人 HOXA1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AKR1B1 Protein Human 重組人 AKR1B1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SFRP4 Protein Mouse 重組小鼠 sFRP4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

JEG-3 細(xì)胞專用培養(yǎng)基OAT-1 (Organic anion transporter 1 0.5mgOAT-1 (Organic anion transporter 1)mouse、rat 陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(大、小鼠同源：人源見bs-0606P)

CEBPG Protein Human 重組人 CEBPG / CEBP gamma 蛋白

IL8重組狗 IL-8 / CXCL8 蛋白 Protein

S100A4 Protein Mouse 重組小鼠 S100A4 蛋白

CA2重組人 Carbonic Anhydrase II / CA2 蛋白 Protein