細胞實驗步驟：

一、細胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

大鼠原代食管成纖維細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持大鼠原代食管成纖維細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含大鼠原代食管成纖維細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用大鼠原代食管成纖維細胞的培養(yǎng)。

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當(dāng)細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當(dāng)細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠乙型肝e抗體(HBeAb)ELISA pcr檢測試劑盒

Human soluble cluster of differeiation 38 (sCD38) ELISA Kit 人可溶性白細胞分化抗原38(sCD38)試劑盒

HumanHelicobacterpyloriIgM,Hp-IgMELISAKit 人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitfor5-(Human5-Nucleotidase)ELISAKit人5核苷酸酶

飲料阿斯巴塘(aspaame)含量薄層色譜法定性試劑盒20次

MouseMacrophageInflammatoryProtein3α,MIP-3αELISAKit小鼠巨噬細胞性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)試劑盒 ，英文名： SP-D ELISA Kit

Porcine keratinocyte growth factor (KGF) ELISA Kit 豬角化細胞生長因子(KGF)試劑盒

轉(zhuǎn)基因植物cry1A基因核酸試劑盒 48T

CLIAKitforMA/Melan-A(HumanMelanomaMarkerA)ELISAKit人黑色素瘤標(biāo)記物

體液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)熒光測定試劑盒50次

ELISAKitPP裸鼠蛋酸酶

溴化乙錠   1g

EthidiumBromide(EB)   1ml(10mg/ml)

乙二醇   500ml

Ethyleneglycol

PE標(biāo)記人CD80單克隆抗體

HLA Class II DR4抗體

CHODL重組小鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 Protein

Smad同源物7(Smad7)重組蛋白 Recombinant Mothers Against Decapentaplegic Homolog 7 (Smad7)

CNPY2重組人 CNPY2 蛋白 Protein

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)

NOV Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 CCN3 / NOV 蛋白

大鼠原代食管成纖維細胞專用培養(yǎng)基Bcl2樣蛋白11(BCL2L11)重組蛋白 Recombinant Bcl2 Like Protein 11 (BCL2L11)

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)

HPGD重組小鼠 HPGD / 15-PGDH 蛋白 Protein

IL6ST Protein Rat 重組大鼠 gp130 / IL6ST / CD130 蛋白

TMED1重組人 TMED1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein