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產(chǎn)品中心

當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞
大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品簡介

大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞的相關(guān)*:細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白(MMP)原位明膠譜法(in situ zymography)熒光染色試劑盒 20次
基質(zhì)金屬蛋白抑制劑(TIMP1/2/3)逆相明膠譜法(reverse gelatin-zymography)電泳分析試劑盒(不含標(biāo)準(zhǔn)樣) 5次
細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白(MMP-2)生物素明膠法比色定量檢測試劑盒 20次
組織基質(zhì)金屬蛋白(MMP-2)生物素明膠

產(chǎn)品廠地:上海市
更新時間:2025-02-25
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:298
詳細(xì)介紹在線留言
品牌其他品牌貨號GOY-01X0959
規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0959

商品介紹:

名稱    大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞   

2.組織來源:血管組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞分離自血管外膜組織;血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成,其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細(xì)胞以成纖維細(xì)胞為主,當(dāng)血管受損傷時,成纖維細(xì)胞具有修復(fù)外膜的能力。有的動脈中膜和外膜的交界處,有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細(xì)胞是血管外膜的主要組成細(xì)胞之一,其主要生理功能合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號CM-R077

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大鼠 AKR1A1 基因全長ORF克隆

大鼠 KRT19 基因全長ORF克隆

大鼠 EEF1G 基因全長ORF克隆

大鼠 MRPL28 基因全長ORF克隆

大鼠 RPS18 基因全長ORF克隆

大鼠 TNNC2 基因全長ORF克隆

大鼠 HBB-B1 基因全長ORF克隆

大鼠 ODAM 基因全長ORF克隆

大鼠 CD9 基因全長ORF克隆

大鼠 TBPL1 基因全長ORF克隆

大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞0.156-10 ng/mL 人毛細(xì)血管擴張性共濟失調(diào)突變基因(ATM)ELISA試劑盒

15.6-1000 pg/mL 傳染性胃腸炎病毒(PTGV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

1.56-100 ng/mL 人胺2,3-雙加氧1(IDO-1)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL 人線粒體烯醇丙酮酸羧激[GTP](mitochondrial PEPCK-M)ELISA試劑盒

BBL液體培養(yǎng)基 英文名稱:BBL Liquid Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

78-5000 pg/mL 人集成復(fù)雜蛋白亞基3( Int3 )ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mL 人載脂蛋白C1(APO-C1)ELISA試劑盒

MEE肉湯 英文名稱:MEE Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g

HBI單增李斯特氏菌生化鑒定條(SN) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:5條/盒

含鐵牛奶培養(yǎng)基 英文名稱:Iron milk medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

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