細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養(yǎng)瓶內，補加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動培養(yǎng)瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態(tài)；

14.將細胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

PED細胞培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持PED細胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含 PED 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于PED細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

DMEM 基礎培養(yǎng)基                445 mL

特級胎牛血清                    50 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養(yǎng)液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補加新鮮培養(yǎng)基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細胞凍存?：

選擇對數(shù)生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠基質金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA pcr檢測試劑盒

Rat soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1 (sPECAM-1/sCD31) ELISA Kit 大鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒

HumanureaserelatedproteinC,UreCELISAKit 人尿素酶相關蛋白C(UreC)pcr檢測試劑盒分裝

Humanai-insulieceptoraibody,AIRA試劑盒人抗胰島素受體抗體(AIRA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物莽草酸脫氫酶(shikimatedehydrogenase;SkDH)電泳分析試劑盒5次

HumanVascularEndothelialcellGrowthFactorD,VEGF-DELISAKit人血管內皮細胞生長因子D(VEGF-D)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠白介素6受體(IL-6R)試劑盒 ，英文名： IL-6R ELISA Kit

Mouse ierleukin 18 (IL-18) ELISA Kit 小鼠白介素18(IL-18)試劑盒

ELISA 小鼠低氧誘導因子1α(mouse HIF-1α) 分裝

CLIAKitforINS(MouseInsulin)ELISAKit小鼠胰島素

通用型腐霉屬種(Pythiumspecies)試劑盒20次

ELISAKitITGαM/CD11b大鼠整合素αM型

小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISAKit   ELISA

小鼠細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISAKit   ELISA

小鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISAKit   ELISA

小鼠雌激素(E)ELISAKit   ELISA

5-三磷酸肌醇受體3抗體

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體

B2M重組大鼠 B2M / Beta-2-microglobulin 蛋白 Protein

GSR/GRase(glutathione reductase 0.5mgGSR/GRase(glutathione reductase) 還原酶抗原

S100A10重組人 S100A10 蛋白 Protein

EPHB2 Protein Human 重組人 EphB2 / Hek5 蛋白 (aa 570-987, His & GST 標簽)

UCHL1 Protein Mouse 重組小鼠 UCHL1 / PGP?

PED 細胞專用培養(yǎng)基GSR/GRase(glutathione reductase 0.5mgGSR/GRase(glutathione reductase) 還原酶抗原

EPHB2 Protein Human 重組人 EphB2 / Hek5 蛋白 (aa 570-987, His & GST 標簽)

B2M重組大鼠 B2M / Beta-2-microglobulin 蛋白 Protein

UCHL1 Protein Mouse 重組小鼠 UCHL1 / PGP9.5 蛋白

S100A10重組人 S100A10 蛋白 Protein